南宫28ng

集萃南宫28ng实验小鼠

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基因编辑细胞系

基因编辑细胞系

背景说明

基因编辑是一种对靶基因或转录产物进行敲除、插入和定点突变等精确修饰的基因工程技术,主要通过人工核酸酶实现对基因组的特定基因序列的敲除、插入或精确修饰。CRISPR系统可批量地敲除或过表达某些基因,因此可用作筛选目标基因,再配合相应的功能实验,即可找出该生命活动或疾病中的关键目标基因。


集萃拥有成熟的CRISPR-Cas9体系,脱靶效应更低,编辑效率更高效;可以进行细胞基因敲除、基因敲入、基因过表达、Luciferase修饰等多种类型的基因编辑;可以根据不同细胞特点选择适宜的转染或感染方法(脂质体转染、电转染及慢病毒感染)。


服务流程

1. 意向分析

  • 基因序列评估与分析

  • 周期、风险点评估

2. 载体构建

  • 质粒构建

  • 病毒包装

3. 细胞转染

  • 病毒感染

  • PB转座子系统

  • RNP

4. 单克隆制备

  • 单克隆化

  • 单克隆筛选

5. 质控

  • PCR/qRCR/WB/流式等

  • 支原体无菌检测、生长曲线等


服务内容

专业的设计和检测团队,可提供载体构建、过表达、干扰、基因敲除、基因敲入稳转细胞株构建及病毒包装与感染服务。构建系统多样,包括但不局限于CRISPR、Tet-On、PB转座子、慢病毒感染及质粒瞬转系统。


基因敲除(Gene Knockout)是研究基因功能的核心技术之一,通过定向删除或失活目标基因,揭示其在生理病理过程中的分子机制。我们提供专业化的基因敲除细胞系构建服务,结合CRISPR-Cas9、TALEN或ZFN等前沿基因编辑技术,为您量身定制高敲除效率、低脱靶效应的细胞模型。


服务类型周期交付标准

相关检测

基因敲除(KO)

稳转Cell Pool(4周起)
单克隆(8周起)               
最终决定于靶点的复杂程度及细胞培养难度

稳转Cell Pool,1*2管

单克隆,1-5*2管

策略、PCR+测序

基因点突变(PM)

稳转Cell Pool(6周起)
单克隆(10周起)                  
最终决定于靶点的复杂程度及细胞培养难度

策略、PCR+测序

基因敲入(KI)

稳转Cell Pool(6周起)         
单克隆(12周起)                 
最终决定于靶点的复杂程度及细胞培养难度

策略、PCR+测序

靶点过表达稳转

稳转Cell Pool(6周起)           
单克隆(10周起)                  
最终决定于靶点的复杂程度及插入情况及细胞培养难度

策略、PCR+蛋白检

Luc过表达稳转株

稳转Cell Pool (3周起)         
单克隆(6周起)                  
最终决定于细胞的培养及转染难度

流式+体外Luc检测


服务优势

  • 技术成熟

拥有成熟的基因编辑技术平台,多种系统可满足各类编辑需求

  • 经验丰富

超3万例基因编辑项目经验;300+种细胞培养及200+种靶点改造经验

  • 服务完善

拥有专业经验丰富的项目管理团队及强大技术支持,满足多方位不同需求定制

  • 质控严格

无菌率及支原体阴性100%,提供基因编辑细胞的蛋白表达水平鉴定



Cancer Types

List of WT Cell Lines

List of Modified Cell Lines

Background

Breast Cancer

4T1

hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)

BALB/c

hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hCD47(Tg)-mCd47(KO)

hHER2 (Tg)

hHER2(Tg)-hCD47(Tg)-mCd47(KO)

hEGFRVIII (Tg)-mEGFRVIII(KO)

hEGFR (Tg)-mEgfr(KO)

hEpCAM(Tg)-mEpcam(KO)

hNECTIN4 (Tg)-mNectin4(KO)

hGCPII (Tg)-mGcpII(KO)

EMT6

hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)

BALB/c

hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hCD47(Tg)-mCd47(KO)

hCD39(Tg)-mCd39(KO)

Colorectal Cancer

CT26

hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)

BALB/c

hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hCD24(Tg)-mCd24(KO

hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hCD39(Tg)-mCd39(KO)

hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hCD47(Tg)-mCd47(KO)

hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hCD73(Tg)-mCd73(KO)

hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hCD39(Tg)-mCd39(KO)-hCD73(Tg)-mCd73(KO)

hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hNECTIN2(hCD112)(Tg) -mNectin2(mCd112)(KO)

hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hCD155(Tg)-mCd155(KO)

hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hB7H3(Tg)-mB7h3(KO)

hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hTNFR2 (Tg)-mTnfr2(KO)

hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-mCLDN18.2(Tg)

hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hVEGFA(Tg)-mVegfa(KO)

hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hHVEM(Tg)-mHvem(KO)

hCD30(Tg)-mCd30(KO)

hCD47 (Tg)-mCd47(KO)

hCD47(Tg)-mCd47(KO)-mPdl1(KO)

hCD47(Tg)-mCd47(KO)-hCD24(Tg)-mCd24(KO

hCD70(Tg)-mCd70(KO)

hCD73 (Tg)-mCd73(KO)

hCD155(Tg)-mCd155(KO)

hHER2 (Tg)

hHER2(Tg)-mHer2(KO)

hHER2(Tg)-hHER3(Tg)

hHER2(Tg)-hHER3(Tg)-mHer3(KO)

hEGFR (Tg)-mEgfr(KO)

hCD24(Tg)-mCd24(KO

hNECTIN4 (Tg)-mNectin4(KO)

h5T4(Tg)-m5t4(KO)

mB2m(KO)

mB2M(KO)-hB2M-hHLA-G(Tg)

HLA-E-hB2M-Peptide(Tg)

hClaudin18.2(Tg)-mClaudin18.2(KO)

hCEACAM5(Tg)-mCeacam5(KO)

hDLL3(Tg)-mDll3(KO)

hGDF15(Tg)-mGdf15(KO)

hGPRC5D(Tg)-mGprc5d(KO)

hLRRC15(Tg)-mLrrc15(KO)

hROR1(Tg)-mRor1(KO)

hSSTR2(Tg)-mSstr2(KO)

hTNFR2 (Tg)-mTnfr2(KO)

hTACSTD2(Tg)

hTACSTD2(Tg)-mTacstd2(KO)

hVEGFA(Tg)-mVegfa(KO)

hVTCN1(Tg)-mVtcn1(KO)

MC38

hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)

C57BL/6

hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hCD24A(CD24)(Tg)-mCd24A(Cd24)(KO

hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hCD47(Tg)-mCd47(KO)

hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hCD73(Tg)-mCd73(KO)

hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hB7H3(Tg)-mB7h3(KO)

hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-mClaudin18.2(Tg)

hCD24A(CD24)(Tg)-mCd24A(Cd24)(KO

hCD30(Tg)-mCd30(KO)

hCD38(Tg)-mCd38(KO)

hCD47 (Tg)-mCd47(KO)

hCD47(Tg)-mCd47(KO)-hCd24(Tg)-mCd24(KO

hCD70(Tg)-mCd70(KO)

hCD73 (Tg)

hHER2(Tg

hHER2(Tg)-mHer2(KO)

hEGFR(Tg)-mEgfr(KO)

hNECTIN4 (Tg)-mNectin4(KO)

mBcma(Tg)

hClaudin18.2(Tg)-mClaudin18.2(KO)

hCEACAM5(Tg)-mCeacam5(KO)

hCSF1(Tg)-mCsf1(KO)

hFAP(Tg)-mFap(KO)

mGdf15(TG)

hGDF15(Tg)-mGdf15(KO)

hHLA2(Tg)

hROR1(Tg)-mRor1(KO)

hSIGLEC15 (Tg)-mSiglec15(KO)

mStk11(KO)

hTACSTD2(Tg)

hTACSTD2(Tg)-mTacstd2(KO)

hTNFR2 (Tg)-mTnfr2(KO)

Lymphoma

A20

hCD19(Tg)-mCd19(KO)-Luc

BALB/c

hCD20(Tg)

hCD20(Tg)-mCd20(KO)-Luc

hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-Luc

hGPRC5D (Tg)-mGprc5d(KO)

MOPC315

hBCMA(Tg)-mBcma(KO)

BALB/c

J558

mBcma(Tg)

BALB/c

Melanoma

B16F10

hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)

C57BL/6

A375

hHLA-G(Tg)

Human

Lung Cancer

LLC1

hSIGLEC15(Tg)-mSiglec15(KO)

C57BL/6

Liver Cancer

H22

hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)

BALB/c

hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-Luc

hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hCD47(Tg)-mCd47(KO)

hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hNECTIN2(hCD112)(Tg) mNectin2(mCd112)(KO)

Gastric Carcinoma

NUGC4

hClaudin18.2(Tg)-mClaudin18.2(KO)-Luc

Human