每年的4月17日为“世界血友病日”，旨在呼吁人们关注出血性疾病诊断不足、缺乏足够的治疗方案以及整体缺乏意识等问题。2025年4月17日是第37个“世界血友病日”，值此机会，集萃南宫28ng为您解读血友病的致病因素、药物研发现状，以及小鼠模型在相关科研中的关键作用。

认识血友病

血友病A和B是由凝血因子VIII（血友病A）和IX（血友病B）缺乏引起的先天性X染色体连锁出血性疾病。血友病的严重程度由残余血浆因子活性决定，分为重度（正常值的<1%）、中度（1-5%）或轻度（5-40%）。在没有预防的情况下，严重血友病患者经常出现关节和肌肉自发性出血事件。

全球血友病A和B的发病率估计分别为1：5000和1：30,000，男性的发病率高于女性。因此，可以预期全球血友病患者人数可能超过110万，其中约40万人可能发展为严重的血友病病例。

血友病药物研发现状

目前血友病的治疗依赖于预防出血，这包括昂贵的终身替代输注血浆凝血因子、重组凝血因子或使用重组单克隆抗体的治疗。

近年来，基因疗法和生物工程重组凝血因子已经彻底改变了血友病患者的治疗方式。这些创新疗法旨在减轻治疗负担，改善患者的生活质量。然而，大约30%的严重血友病A患者和高达10%的严重血友病B患者会产生针对重组凝血因子的抗体。因此，研究者正在开发与评估其他新型疗法，包括下一代替代因子、重新平衡止血的药物以及基因疗法。

集萃南宫28ng血友病小鼠模型助力临床前研究

目前血友病新药研发仍具有巨大的潜力，在研发过程中离不开合适动物模型的加持。针对血友病的发病机制及对应的缺陷基因，集萃南宫28ng利用CRISPR/Cas9技术构建了B6J-F8-KO（品系编号：T004727）血友病A小鼠模型和B6J- F9-KO（品系编号：T013686）血友病B小鼠模型。B6J-F8-KO小鼠F8活性显著降低，约为野生型小鼠的3%，为中度血友病A模型（图1）。并且，B6J-F8-KO小鼠的活化部分凝血活酶时间（APTT）显著延长（图2），在断尾试验后，小鼠尾部出血量和出血时间均显著增加（图3）。以上结果共同说明该品系作为血友病A模型的适用性。

图1 B6J-F8-KO小鼠F8活性检测

图2 B6J-F8-KO小鼠活化部分凝血活酶时间检测

图3 B6J-F8-KO小鼠断尾试验出血量和出血时间检测

为评估B6J-F8-KO小鼠是否适用于药物和治疗方法评价，集萃南宫28ng采用Novoeight与Xyntha两种已上市的短效FVIII重组因子药物作为阳性药，分析其能否改善B6J-F8-KO小鼠的凝血。研究团队发现，使用FVIII重组因子可显著降低B6J-F8-KO小鼠活化部分凝血活酶时间和断尾出血时间（图4）。此外，B6J-F8-KO小鼠也已被用于小核酸疗法与AAV基因疗法的临床前药理药效评价实验。

图4 B6J-F8-KO小鼠阳性药结果

B6J- F9-KO血友病B模型小鼠F9基因mRNA水平显著降低（图5）。并且，凝血实验显示，KO雄性半合子与雌性纯合子的APTT显著增加（图6），在断尾试验后小鼠尾部出血时间也显著增加。以上结果说明该小鼠能很好模拟血友病B的临床症状。

图5 B6J-F9-KO小鼠F9基因mRNA水平检测

图6 B6J-F9-KO小鼠活化部分凝血活酶时间检测

图7 B6J-F9-KO小鼠断尾试验出血时间检测

相关小鼠模型品系见下表