小鼠繁育
小鼠性成熟早,一般雄鼠8W,雌鼠6W。
检栓配的常见操作如下:
1)优先挑选生长状态好的雄鼠在配繁前至少提前3天单放。
2)检栓前一天下午15:30~17:00挑选发情的雌鼠放入单放雄鼠的笼盒中,雄雌按照1:2比例配繁。
3)雄雌合笼后第二天上午8:00~10:00检栓,见栓鼠在雌鼠阴 道口可见1个白色、绿豆大小的阴 道栓,防止精子倒流(如下图)。
见栓鼠
见栓鼠判断,取出需要检栓的鼠笼,食指和拇指捏住雌鼠尾巴根部1cm处,其余3指按住小鼠背部使生殖器露出,将检栓针放进生殖器内,感受是否有栓塞的阻力,有阻力的为见栓小鼠,无阻力的为没有见栓。
见栓雌鼠放入新鼠笼中,同品系不同雄鼠的见栓雌鼠建议分开放置,每个繁殖笼中最多放2只见栓雌鼠。见栓雌鼠在见栓13~15天内观察是否怀孕,如未怀孕可根据实验需要安排再次检栓。
南宫28ng目前常用的小鼠标记编号方法分为3种:断趾编号法、耳标器编号法、耳缘打孔编号法。
(1)断趾编号法:
适用范围:该方法适用于出生5~7天脚趾完整的幼仔。除特殊表型(如:先天性脚趾畸形的品系)、特殊模型小鼠(如:败血症模型小鼠、关节炎模型小鼠)不适用外其他品系均适用。
抓取小鼠:单手或双手保定好小鼠,翻转手心使鼠腹面朝上面向自己,四肢张开下图所示。
编号方式:小鼠左下、右下脚趾依次标记为1~10号,左上、右上脚趾依次标记为20~90号。剪断相应的脚趾则代表对应的号码,逢整百数不做标记。例如:58号小鼠标记为剪断对应的50号脚趾和8号脚趾,逢百号小鼠不剪脚趾,如下图所示。注意重号小鼠不可同笼,如:118#、18#为重号小鼠需分笼放置。
注意事项:小鼠断趾仅在远侧指骨和中侧指骨的关节处进行,使用锋利器械进行操作,减少小鼠应激。
(2)耳标器编号法:
适用范围:适用于成年小鼠,除特殊表型如先天性耳朵溃烂的品系不适用外其他品系均适用。
抓取方式:单手或双手保定好小鼠,露出小鼠的耳朵,使小鼠腹部向下。
编号方法:将带有编号的耳标装入耳标器内,使用耳标器将耳标打入小鼠的耳朵上,如下图所示。
注意事项:采用耳标器编号法时,应定期观察笼内小鼠耳标是否有因为打架、抓、挠等原因导致耳标掉落的,若发现耳标掉落,应及时补打耳标,便于区分。
耳标器
(3)耳缘打孔编号法:
适用范围:适用于成年小鼠,除特殊表型(如:先天性耳朵溃烂的品系)不适用外其它品系均适用。
抓取方式:单手或双手保定好小鼠,露出小鼠的耳朵,使小鼠腹部向下。
抓取方式:单手或双手保定好小鼠,露出小鼠的耳朵,使小鼠腹部向下。
编号方法:使用耳标器和手术剪在对应编号位置将小鼠耳朵标记耳洞或者剪成缺口状,使小鼠头向前,腹部朝下,背部对着操作人员,左耳可标记“十位数”,右耳可标记“个位数”,逢整百数不做标记,如下图所示。
注意事项:小鼠的耳洞或缺口可能长好,如果同窝小鼠打架可能撕裂耳洞和缺口。若发现耳号撕裂应及时做好记录,并确保该动物仍能被辨识。
观察肛 门与生殖器间的距离,一般雄鼠的距离是雌鼠的两倍(较适合于区分0~8天的小鼠)
雌性小鼠可以观察到有乳头,雄性小鼠无
非白化大小鼠品系雄鼠的外生殖器下方和肛 门上方有一有色的点状部位
雌性小鼠生殖器与肛 门中间连线无毛,雄性小鼠两者中间连线有毛
小鼠不同日龄的特征见下:
日龄 | 判断标准 | 参考图片 |
0-1天 | 新生小仔全身没有毛,皮肤赤红,两眼不睁,耳廓和皮肤粘连,头大尾短,可发出声音,有触觉、嗅觉与味觉。 新出生小仔胃里没有奶块,如是凌晨出生的小仔,胃里奶块较小。
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2天 | 白色品系小仔颜色变成粉红,黑色品系小仔皮肤颜色发暗,白色奶块明显。
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3天 | 有色品系鼠开始变色,雄鼠可以看到有生殖器点。3日龄小仔脐带脱落,小鼠耳廓和皮肤开始分开。
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4~5天 | 4日龄小仔耳朵发育成熟,完全脱离头皮,小仔的脚趾还未完全张开,不宜剪趾标号,以防辨别不清。 5日龄小仔耳朵完全靠后,有毛色小鼠毛色更加明显,脚趾逐渐分开。
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6~7天 | 6日龄浅色毛小鼠开始变色,小鼠脚趾也完全张开。 7日龄浅色毛小鼠毛色变化更加明显,多毛色小鼠已经能分出毛色。 剪脚趾编号须在小仔5~7日龄内完成。
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8天 | 毛色明显区分,而且四肢发育,能爬行。雌鼠能明显观察到乳腺,5对乳头点。
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9~11天 | 全身长毛,眼睛未睁开
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12~13天 | 12天小仔还未完全睁眼,经过24小时后小鼠眼睛睁开,有跳跃跑动现象。
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17~19天 | 17天的小仔耳朵未完全舒展开。 19天的小仔耳朵已经完全张开、竖起,这时小仔可以分笼。
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19~21天 | 小鼠分笼日龄,又称幼鼠离乳,需将母鼠和她哺育的小仔分开单独饲养,小仔断奶后体重约6~10g。
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常见的原因有以下几种:
1)品系特性,母性差(可在生仔后适当减少不需要的性别或基因型的小仔,提高代乳);
2)饲养环境问题,如温度过低、噪声过高等;
3)人为干扰,如过于频繁的观察小鼠、移动笼盒、触摸小鼠等;
解决建议:
1)排除品系中的个例;
2)保证环境温度、湿度、噪声等符合国标要求;
3)提前将孕鼠更换至笼架中下层光线较暗的位置;
4)雌鼠生仔前后2~3天避免人为干扰,重要品系可考虑提前准备代乳鼠;
5)将母性较好的品系和母性差的品系在相近时期合笼,选择妊娠天数比孕鼠大1~3天的鼠来代乳,待孕鼠生产后,将小仔放入代乳鼠笼内进行代乳。
小鼠需要细致的照料,舒适的居住环境有利于小鼠的健康生长。日常需加强对小鼠的观察,如小鼠状态、采食情况、笼盒干净程度等。
小鼠的饲养过程中需进行合笼和分笼操作。合笼指繁殖笼的形成,即一般雄鼠8周,雌鼠6周左右性成熟时,可进行合笼交配繁育。小鼠的妊娠期和哺乳期一般20天左右,19~21天可进行分笼操作,幼鼠离乳,即将雌雄小鼠分开饲养。
换笼操作,根据鼠笼饲养密度调整换笼频率,建议1-2周换一次笼。
繁殖笼盒在母鼠生产期前后需减少惊动,新生仔3天内不建议换笼,小鼠生仔的观察过程中尽量做到轻拿轻放,在观察过程中动作轻柔,避免惊吓母鼠及小仔,造成母鼠吃仔或仔亡。免疫缺陷模型类品系对病原体易感,对饲养环境的要求很高,推荐每周换笼一次。若未能确保环境的洁净度,肠道共生微生物可能会在免疫缺陷小鼠中引起病理变化。
糖尿病模型,因其多饮多尿的疾病特征,饲养期间小鼠笼盒较容易潮湿和脏,易对小鼠的健康状况产生影响,建议降低饲养密度、增加垫料更换频率,如一周2换或3换。
饲养方式,小鼠采用任食的方式饲养,日常需确保提供足够的食物,经常检查水和食的供应,保证小鼠能够正常获得水和食物(肥胖小鼠在找食物和水方面更困难,需特别注意)。为确保饲料和饮水的新鲜,每周添加或更换1-2次饮食。