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南宫NG·28(中国)相信品牌力量有限公司

集萃南宫28ng实验小鼠

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技术资源

  • 为什么我们在设计方案的时候需在客户要求的入组数量基础上增加小鼠的订购量?

    与构建DIO小鼠实验类似,即便是基因改造的自发模型小鼠,其生理指标也会在个体间存在差异,比如BKS-DB小鼠在药效实验前需要进行体重和血糖等指标检测,会有部分个体不符合入组要求(体重太轻或血糖不达标)。此外在手术/诱导类造模实验过程中可能存在动物意外死亡的情况,因此也需要额外订购小鼠作为备用。

  • BKS-DB小鼠肾脏并发症情况

    BKS-DB是经典的糖尿病模型,大部分小鼠会出现肾病并发症,但严重程度也不一致,可以结合体重和血糖等指标综合判断。一般情况下,部分小鼠在16W开始出现严重的肾脏并发症,表现为肾脏组织粘连,无法取出完整肾脏做病理学检测或小鼠死亡的情况。部分血糖较高小鼠可能会在12W甚至更早出现类似严重肾脏并发症。小鼠出现了糖肾并发症后,肾脏内部结构被破环,影响肾脏过滤、重吸收、分泌等功能,尿液会呈现乳白色,质地较粘稠。如进行血糖相关研究,建议在实际入组数量的基础上额外采购20%~30%以上的富余量,或者选择较早周龄取材。糖肾解剖表型示例如下,随着病程的发展,实际剖检情况可能略有差异。

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    一般对于肾脏病变的评价指标有病理切片、血生化和尿生化,其中尿生化数据是相对最不稳定的,建议结合其他两项检测来进行判断。如进行糖肾相关研究,需严格设置入组指标,选择合适的小鼠入组实验。另外,易出现批次间差异,建议批次内比较。


  • BKS-DB小鼠血糖波动问题

    4~8周龄期间是db/db小鼠的糖尿病发病期,在此期间db/db小鼠血糖水平和糖代谢紊乱程度会出现个体间的差异,但到8周龄后几乎所有db/db小鼠的发病状态趋于一致。db/db小鼠的高血糖症状并不会像ob/ob小鼠那样在3~4月龄逐渐回落,而是会一直保持很高的血糖水平,可能的原因是db/db小鼠的胰岛在经历代偿性增生以后会逐渐进入到失代偿阶段(胰岛出现萎缩),胰岛素的分泌水平在3~4月龄期间会逐渐下降,这进一步加剧了血糖调控的失衡,并且db/db小鼠这样的胰岛功能变化与人类2型糖尿病患者的变化非常相似,因此不同周龄的db/db小鼠可以模拟人类2型糖尿病从早期到中晚期的不同的病变特点,这也使db/db小鼠成为在2型糖尿病研究中使用最广泛的经典遗传模型。


    4~8W为血糖快速升高期,该期间小鼠血糖浮动范围较广,不同个体间的血糖差异也较大,如果采用此周龄段的小鼠进行实验,建议实验前严格测血糖分组,且实验结果可能会有一定的误差。


    8W以后血糖值渐渐趋于一致,但仍然存在个体差异导致血糖不均一的情况,建议采购20% ~ 30%的富余量。发鼠前不对血糖进行质控,如客户实验对于血糖要求比较高,可以考虑付费测血糖后发出,方法为断尾测血糖,默认不打耳标,如有打耳标需求,须在订购前沟通。


    另外,也存在测量不准确的问题,引起血糖不准的因素有很多,如环境刺激、小鼠状态、测量时间,饱腹程度(禁食时间)等都会影响血糖测定。建议饲养在SPF级动物房、保证饮水和饮食充足、勤换垫料、减少应激、统一采血方式和测量时间,接收到小鼠后需要进行5~7天适应性饲养再进行检测和实验,以减小误差。

  • 如何应对BKS-DB小鼠血糖超上限的情况?

    一般眼眶或颌下取血的方式对BKS-DB小鼠进行采血(30ul左右),分离血浆,稀释后使用血生化仪检测,需要注意的是,血生化检查血糖值和真实值直接存在差异。因涉及创伤,这种方法检测血糖的间隔建议在2周左右。此外这种方法不适合于BKS-DB小鼠GTT检测,因为短时间内频繁采血会对动物产生强烈的应激,造成血糖数据不稳定。可以通过增加糖化血红蛋白检测来反映血糖水平。

  • BKS-DB小鼠适合做GTT实验吗?

    可以做,但是BKS-DB小鼠本底情况下血糖值很高,在这种情况下进行常规OGTT实验会造成15-90min间的采血点血糖值超过血糖仪检测上限,无法判断药物的潜在效果。

  • DIO小鼠都能在10周后增重80%以上吗?

    不一定,B6小鼠会有一定的比例喂不胖,根据我们的实验统计,大致比例为25%,因此南宫28ng在造模时会放大25%富余量小鼠,保障提供的小鼠均体重达标,在设计实验时需注意订购富余量小鼠。


  • 客户提供的细胞在项目中没有成功成瘤怎么办?

    这种情况是会出现的,由于细胞特性的不同、在动物体内生长环境和培养皿环境的不同,会带来细胞不同生长趋势的结果,也和细胞接种量、动物选择性有关。所以,建议对于新改造的或新购买的细胞,不要直接开展大规模的药效,而是先做小规模的成瘤性测试,摸索成瘤条件,避免造成不必要的损失。

  • 客户能提供细胞进行成瘤或药效实验么?

    可以的。客户需要提供支原体检测报告,我司会做支原体检测复核。因支原体是SPF动物房禁止带入的微生物,也会对成瘤性测试或药效实验带来不准确的实验结果。客户可提供该细胞的小样,支原体检测报告为阴性的时候,方可启动正式实验,正式实验细胞注射后还会留取小样再进行复核。

  • 为什么huHSC免疫重建需要辐照,而PBMC不需要?

    亚致死剂量的清髓(清除的不全是干细胞),目的是为了提高huHSC移植后小鼠体内的重建水平。PBMC为外周血单个核细胞,该方法可以在较短时间内实现快速的免疫系统重建,小鼠不需要提前清髓处理。

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